高通量組織研磨儀研磨腫瘤組織提取RNA

高通量組織研磨儀研磨腫瘤組織提取RNA

實驗目的

       研磨破碎腫瘤組織細胞（如胰腺、肺、肝等器官的腫瘤組織），后續(xù)提取其RNA。

實驗原理

       通過研磨珠撞擊腫瘤組織細胞，使其細胞膜破裂，其內(nèi)的RNA暴露。

實驗材料和器具

樣品：腫瘤組織細胞

儀器：高通量組織研磨儀（上海凈信，Tissuelyser-48）

耗材：離心管（上海凈信，0.4研磨單位），研磨珠（上海凈信，3號）

實驗步驟

1.取組織塊解凍，用生理鹽水洗去血污，剪取約0.5g組織，剪小放入0.4研磨單位離心管中；

2.加入一粒6號的研磨珠，（如果用0.3研磨單位的離心管，加入三或五粒的3號的研磨珠），加入0.09體積 TES混勻，再加入0.01ml SDS（10%），0.001ml蛋白酶K（20mg/ml），充分混勻；

3.離心管放入研磨機中，設置參數(shù)13單位振頻，60秒，程序結束即可得到破碎原液；

4.完成后續(xù)RNA提取步驟。

實驗結果